国产成人午夜精品一区二区三区,成 人3d动漫在线观看,老师露出两个奶球让我吃奶头,啦啦啦中文免费视频高清观看

預(yù)存
Document
當(dāng)前位置:文庫百科 ? 文章詳情
實時熒光定量PCR實驗中會出現(xiàn)的問題有哪些?
來源:測試GO 時間:2022-10-28 11:34:10 瀏覽:4185次

在科研人員進行實時熒光定量PCR的實驗操作中遇到了不計其數(shù)的問題,本文就給大家分享在實驗過程中出現(xiàn)頻率最高的一些問題:

 內(nèi)參基因COL1(擴增曲線)

一、Ct值出現(xiàn)

檢測熒光信號的步驟有誤:一般SybrGreen法采用72℃延伸時采集,Taqman法則一般在退火結(jié)束時或延伸結(jié)束采集信號。

1、引物或探針降解:可通過PAGE電泳檢測其完整性。

2、模板量不足:對未知濃度的樣品應(yīng)從系列稀釋樣本的最高濃度做起。

3、模板降解:避免樣品制備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況。

二、Ct值出現(xiàn)過晚(Ct>38

1、擴增效率低:反應(yīng)條件不夠優(yōu)化。設(shè)計更好的引物或探針;改用三步法進行反應(yīng);適當(dāng)降低退火溫度;增加鎂離子濃度等。

2、PCR各種反應(yīng)成分的降解或加樣量的不足。

3、PCR產(chǎn)物太長:一般采用80-150bp的產(chǎn)物長度。

三、溶解曲線不止一個主峰

1、引物設(shè)計不夠優(yōu)化:應(yīng)避免引物二聚體和發(fā)夾結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)。

2、引物濃度不佳:適當(dāng)降低引物的濃度,并注意上下游引物的濃度配比。

3、鎂離子濃度過高:適當(dāng)降低鎂離子濃度,或選擇更合適的mix試劑盒。

4、模板有基因組的污染:RNA提取過程中避免基因組DNA的引入,或通過引物設(shè)計避免非特異擴增。

四、擴增效率低

1、反應(yīng)試劑中部分成分特別是熒光染料降解。

2、反應(yīng)條件不夠優(yōu)化:可適當(dāng)降低退火溫度或改為三步擴增法。

3、反應(yīng)體系中有PCR反應(yīng)抑制物:一般是加入模板時所引入,應(yīng)先把模板適度稀釋,再加入反應(yīng)體系中,減少抑制物的影響。


測試狗文庫百科

評論 / 文明上網(wǎng)理性發(fā)言
12條評論
全部評論 / 我的評論
最熱 /  最新
全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
點贊12
回復(fù)
全部
查看更多評論
相關(guān)文章

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應(yīng)用技術(shù)

2023-10-08

熱重分析(TG-DTG)曲線的幾種解析方法

2023-12-26

接觸角測試(CA)的原理、樣品制備要求及實際應(yīng)用

2023-11-16

一文詳細介紹he染色的基本原理、實驗步驟及注意事項

2023-11-23

恒電流間歇滴定法GITT的基本原理以及測試教程

2022-08-12

TMA技術(shù)的基本概念、應(yīng)用領(lǐng)域以及實際操作中的要點

2023-12-06

熱門文章/popular

基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS(概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu))

晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程(下篇)

手把手教你用ChemDraw 畫化學(xué)結(jié)構(gòu)式:基礎(chǔ)篇

【科研干貨】電化學(xué)表征:循環(huán)伏安法詳解(上)

電化學(xué)實驗基礎(chǔ)之電化學(xué)工作站篇 (二)三電極和兩電極體系的搭建 和測試

【科研干貨】電化學(xué)表征:循環(huán)伏安法詳解(下)

微信掃碼分享文章
挺进大幂幂的滋润花苞御女天下| 麻豆国产尤物av尤物在线观看| 亚洲熟女乱色综合亚洲图片| 蜜桃av噜噜一区二区三区视频| 精品久久久久久亚洲精品| 无码人妻精品一区二区蜜桃在线看| 在线观看视频| 成品网站w灬源码1688小说| 亚洲av无码一区二区三区人| 小雪嗯快啊高潮了喷水了| 故意短裙公交车被强好爽h| 性做久久久久久| 俄罗斯人与物动性xxxxx| 少妇洁白无删减版178章| 老师洗澡时让我进去摸她那个| 女人十八片毛片免费视频| 少妇饥渴偷公乱400章深夜书屋| 美女脱内衣让男生揉摸的视频| 天堂网在线观看| 蜜臀久久久久久999草草| 日本无翼乌邪恶彩色大全| 村长用力挺进她的花苞啥电视| 久久9精品区-无套内射无码| 国产免费av| 色欲av色臀av精东传媒| 高h喷水荡肉爽文np肉色学校| 国产精品视频一区二区| 成全动漫视频在线观看免费高清| 精品无人乱码一区二区三区| a片免费| 高潮久久久久久久久不卡| 老熟女重囗味hdxx70星空| caoporm碰视频公开视频| 把朕的龙精含着h太子妃| 免费a级毛片18禁网站免费| 女人被躁到高潮嗷嗷叫视频| 狠狠综合久久av一区二区三区| 小s货再浪些再咬紧点h| 国产成年无码AV片在线韩国| 苏桃的骚乱文肉np| 性色av色香蕉一区二区蜜桃|